Linkage Studies
Der er indtil nu rapporteret om fem loci, der er blevet forbundet med RLS. Det første genetiske locus for RLS blev kortlagt på kromosom 12q af Desautels og kolleger38 i en stor fransk-canadisk familie. Resultaterne var imidlertid overraskende, fordi den signifikante sammenkobling blev opnået ved at anvende usædvanlige parametre, dvs. en recessiv model og en meget almindelig sygdomsallelfrekvens (25 %), mens inspektion af stamtræet tyder på en autosomal dominantlignende segregation. Andre grupper undlod at replikere resultaterne.39,40 Vi har imidlertid fundet yderligere beviser, der støtter koblingen til dette locus i yderligere fransk-kanadiske RLS-familier.84 Senest er dette locus blevet bekræftet i en stor kohorte af islandske prøver rapporteret af Hicks og medarbejdere.86 Deres genom-dækkende koblingsanalyse af 1100 mikrosatellitmarkører i 382 ramte individer, der opfyldte de fire diagnostiske kriterier fra 126 familier, gav en LOD-score på 2,4 ved hjælp af en ikke-parametrisk metode for kun ramte individer. Samtidig genanalyse af de samme genotypedata med PLMS-fænotype (dikotomisk periodisk benbevægelsesindeks >10) gav en LOD-score på 3,9 (p = 1,02 × 10-5, likelihood ratio z-score = 4,25). Selv om resultaterne ikke er signifikante på hele genomet efter korrektion for multiple test, støtter de RLS1-lokusset på kromosom 12q. En yderligere undersøgelse foretaget af den tyske gruppe tyder på, at en lavpenetrerende allel blev overtransmitteret i 12 bayerske RLS-familier med 70 patienter med en bekræftet diagnose af RLS.87 Derfor er RLS-lokusset på kromosom 12q det eneste sammenkædede lokus, der i øjeblikket er replikeret i yderligere prøver og forskellige populationer, og det er således fortsat den vigtigste kandidatregion for RLS. Den potentielle alleliske heterogenitet, den lave sygdomsgennemtrængning og den høje fænokopieringsrate har imidlertid gjort opfølgningsundersøgelser vanskelige.
Der er rapporteret om yderligere to kandidatloki for RLS: et på kromosom 14q (RLS2) i en italiensk familie40 og det andet på kromosom 9p (RLS3) i to amerikanske familier.31 Lokus 14q (RLS2) blev bekræftet med suggestiv linkage i en fransk-canadisk familie.88 Linkage til RLS3-locus blev også understøttet af TDT i en bayersk familie.89 Desuden har vi identificeret et fjerde locus for RLS på kromosom 20p13 (RLS4) i en anden stor fransk-kanadisk familie med en multipoint LOD-score på 3,87 under en dominant model.90 Pichler og medarbejdere91 rapporterede om det femte locus for RLS på kromosom 2q i et sydtyrolsk befolkningsisolat. Tabel 8-1 indeholder en oversigt over disse fem loci.
Loci på kromosom 12q, 14q og 20p blev alle identificeret ved hjælp af enkeltfamilier, mens den tredje og femte loci på 9p og 2q blev opdaget ved en genomscanning af multiple multiplex stamtavler. Samlet set blev der ikke rapporteret om det genomdækkende signifikante niveau og færdiggørelsesgraden af genomscanningerne. Baylor-gruppens undersøgelse er den næststørste genomscanning af RLS-familier, der er udført til dato. Imidlertid påviste de genomdækkende nonparametriske analyser ikke nogen region med genomdækkende signifikans. Opfølgningen af fem regioner med nonparametrisk linkage (NPL) større end 2,0 førte til identifikation af to familier (med henholdsvis otte og seks ramte individer) med kompatibel linkage til kromosom 9p-regionen. Disse to familier, der var forbundet, segregerede imidlertid to forskellige haplotyper, hvilket indikerer allelisk genetisk heterogenitet. Mere overbevisende var det, at 16 ramte individer fra tre forskellige familier viste haplotypedeling i den tyrolske undersøgelse for RLS5 på kromosom 2q.91 Ingen af de linkageresultater, der er rapporteret til dato, kan forklare den høje prævalens af RLS; tværtimod peger de alle på, hvis linkageresultaterne holder stik, kompleks allelisk og genetisk heterogenitet.84
I den klassiske humangenetiks opfattelse opdeles sygdomme i mendelske lidelser og komplekse egenskaber. Selv om førstnævnte tilskrives mutationer i et enkelt gen med en simpel arveform, menes sidstnævnte at skyldes miljøfaktorer samt flere gener, der hver især spiller en lille og interaktiv rolle for modtagelighed for sygdomme i den almindelige befolkning. Set fra et klinisk perspektiv kan der observeres et kontinuum af fænotypiske manifestationer. I den ene ende af spektret findes sygdomme forårsaget af fuldt penetrerende skadelige mutationer; i den modsatte ende findes sygdomme forårsaget af rene miljøfaktorer. Mellem disse to yderpunkter ligger de ufuldstændigt penetrerende og de polygene sygdomme, hvilket skaber en glidende overgang fra strengt genetiske til multifaktorielle sygdomme. Heterogenitet er den fællesnævner for nogle komplekse træk og kan betragtes som den vigtigste hindring, der skal overvindes i undersøgelser, der har til formål at finde prædisponerende gener. Identifikation af biomarkører eller specifikke kliniske træk vil gøre det muligt at stratificere tilfældene i mere homogene grupper og dermed gøre det lettere at dissekere den komplekse heterogenitet. I denne sammenhæng afslørede en nøje undersøgelse af RLS-familier, der er knyttet til de fire rapporterede RLS-loci, ikke nogen specifikke kliniske træk eller målinger, der ville gøre det muligt at stratificere prøverne, bortset fra de høje PLMS-målinger i den italienske RLS-familie, der er knyttet til kromosom 14q31,38,40 og de fransk-kanadiske familier, der er knyttet til kromosom 12.84 Tidlig AO er blevet impliceret i genetiske former for RLS,28,49,55 men denne kliniske parameter er endnu ikke blevet rapporteret som formelt integreret i linkage-analyser.