Hyperkromisuus

Hyperkromisuus on materiaalin absorbanssin (optisen tiheyden) kasvua. Tunnetuin esimerkki on DNA:n hyperkromisuus, joka syntyy, kun DNA-dupleksia denaturoidaan. UV-absorptio lisääntyy, kun kaksi yksittäistä DNA-säiettä erotetaan toisistaan joko lämmöllä tai lisäämällä denaturointiainetta tai alentamalla pH-tasoa. Päinvastaista, absorbanssin vähenemistä kutsutaan hypokromaattisuudeksi.

Suositeltu lisätieto

DNA:n lämpödenaturaatio, jota kutsutaan myös sulatukseksi, saa aikaan sen, että kaksoiskierrerakenne purkautuu muodostaen DNA:n yksittäisjuosteita. Kun liuoksessa olevaa DNA:ta kuumennetaan sen sulamislämpötilan yläpuolelle (yleensä yli 80 oC), kaksoisjuosteinen DNA purkautuu muodostaen yksijuosteista DNA:ta. Emäkset irtoavat ja voivat siten absorboida enemmän valoa. Natiivitilassaan DNA:n emäkset absorboivat valoa 260 nm:n aallonpituusalueella. Kun emäkset purkautuvat, absorptiomaksimin aallonpituus ei muutu, mutta absorboituva määrä kasvaa 30-40 prosenttia.

Hyperkromisuuden avulla voidaan seurata DNA:n tilaa lämpötilan muuttuessa. Siirtymä-/ sulamislämpötila (Tm) on lämpötila, jossa UV-valon absorbanssi on 50 % maksimin ja minimin välillä, eli jossa 50 % DNA:sta on denaturoitunut.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.