Kytkentätutkimukset
Tähän mennessä viiden lokuksen on raportoitu olevan yhteydessä RLS:ään. Desautels ja kollegat38 kartoittivat ensimmäisen RLS:n geneettisen lokuksen kromosomille 12q suuressa ranskalais-kanadalaisessa perheessä. Tulokset olivat kuitenkin yllättäviä, koska merkitsevään yhteyteen päädyttiin käyttämällä epätavallisia parametreja eli resessiivistä mallia ja hyvin yleistä taudin alleelifrekvenssiä (25 %), kun taas sukutaulun tarkastelu viittaa autosomaaliseen dominoivaan segregaatioon. Muut ryhmät eivät onnistuneet toistamaan tuloksia.39,40 Olemme kuitenkin löytäneet lisätodisteita, jotka tukevat linkittymistä tähän lokukseen muissa RLS:n ranskalais-kanadalaisissa perheissä.84 Viimeisimpänä tämä lokus on vahvistettu islantilaisista näytteistä koostuvassa laajassa kohortissa, jonka Hicks ja kumppanit ovat raportoineet.86 Heidän tekemässään koko genomin kattavassa linkitysanalyysissä, jossa käytettiin 1100 mikrosatelliittimarkkeria 382:lla sairastuneella henkilöllä, jotka täyttivät neljä diagnoosikriteeriä, ja jotka olivat peräisin 126:sta 126:sta eri suvusta, LOD-arviointipistemääräeksi saatiin 2,4, ja sitä varten käytettiin vain sairastuneille soveltuvaa, ei-parametrista menetelmää. Samojen genotyyppitietojen samanaikainen uudelleenanalyysi PLMS-fenotyypin (dikotominen jaksottainen jalkojen liikeindeksi >10) kanssa tuotti LOD-pistemääräksi 3,9 (p = 1,02 × 10-5, todennäköisyyssuhteen z-pistemäärä = 4,25). Vaikka tulokset eivät ole genomin laajuisesti merkitseviä monitestauksen korjauksen jälkeen, ne tukevat kromosomissa 12q sijaitsevaa RLS1-lokusta. Saksalaisen ryhmän tekemän lisätutkimuksen mukaan 12 baijerilaisessa RLS-perheessä, joissa oli 70 potilasta, joiden RLS-diagnoosi oli varmistettu, esiintyi matalan penetrantin alleeliä.87 Näin ollen kromosomissa 12q sijaitseva RLS-lokus on ainoa yhdistetty lokus, joka on toistettu uusissa näytteissä ja eri populaatioissa, ja näin ollen se pysyy edelleen tärkeimpänä ehdokkaana RLS:n aiheuttajaksi. Mahdollinen alleelinen heterogeenisuus, alhainen taudin läpäisevyys ja korkea fenokopioiden määrä ovat kuitenkin vaikeuttaneet seurantatutkimuksia.
Kahdesta muusta RLS:n kandidaattilokuksesta on raportoitu: toinen kromosomissa 14q (RLS2) yhdessä italialaisessa suvussa40 ja toinen kromosomissa 9p (RLS3) kahdessa amerikkalaisessa suvussa.31 Kromosomissa 14q sijaitseva lokus 14q (RLS2) vahvistettiin viitteellisellä yhteydellä yhdessä ranskankielisessä kanadalaisessa suvussa.88 TDT-tutkimus vahvisti myös linkityksen RLS3-lokukseen yhdessä baijerilaisessa perheessä.89 Lisäksi olemme tunnistaneet RLS:n neljännen lokuksen kromosomissa 20p13 (RLS4) eräässä toisessa suuressa ranskankanadalaisessa perheessä, jonka monipisteinen LOD-pistemäärä oli 3,87 dominoivassa mallissa.90 Pichler ja työtoverit91 raportoivat viidennen RLS:n lokuksen kromosomissa 2q etelätirolilaisessa populaatioisolaatissa. Taulukossa 8-1 on yhteenveto näistä viidestä lokuksesta.
Kromosomin 12q, 14q ja 20p lokukset tunnistettiin kaikki yksittäisten perheiden avulla, kun taas kolmas ja viides lokus 9p:ssä ja 2q:ssä löydettiin moninkertaisten moninkertaisten sukutaulujen genomiskannauksessa. Kaiken kaikkiaan genomin laajuista merkitsevyystasoa ja genomiskannausten valmistumisastetta ei raportoitu. Baylorin ryhmän tutkimus on toistaiseksi toiseksi suurin RLS-perheille tehty genomiskannaus. Genomin laajuisissa ei-parametrisissä analyyseissä ei kuitenkaan havaittu yhtään aluetta, jolla olisi genomin laajuinen merkitsevyys. Seuraamalla viittä aluetta, joiden ei-parametrinen linkitys (NPL) oli yli 2,0, tunnistettiin kaksi perhettä (joissa oli kahdeksan ja kuusi sairastunutta henkilöä), joilla oli yhteensopiva linkitys kromosomin 9p alueelle. Näissä kahdessa linkittyneessä perheessä oli kuitenkin kaksi erilaista haplotyyppiä, mikä viittaa alleeliseen geneettiseen heterogeenisuuteen. Vielä vakuuttavampaa on, että 16 sairastunutta yksilöä kolmesta eri perheestä osoitti kromosomissa 2q sijaitsevan RLS5:n osalta haplotyyppien jakamista Tirolin tutkimuksessa.91 Mikään tähän mennessä raportoiduista linkitystuloksista ei voi selittää RLS:n suurta esiintyvyyttä; päinvastoin, jos linkitystulokset pitävät paikkansa, ne kaikki viittaavat monimutkaiseen alleeliseen ja geneettiseen heterogeenisuuteen.84
Klassisen ihmiskäyttäytymisen genetiikan näkökulmasta taudit jaetaan mendeliläisiin häiriötiloihin (mendeelian disorders) ja kompleksisiin ominaisuuksiin (complex traits). Vaikka ensimmäiset johtuvat yhden geenin mutaatioista, joilla on yksinkertainen periytymistapa, jälkimmäisten uskotaan johtuvan ympäristötekijöistä sekä useista geeneistä, joilla kullakin on pieni ja vuorovaikutteinen rooli tautialttiudessa väestössä. Kliinisestä näkökulmasta voidaan havaita fenotyyppisten ilmenemismuotojen jatkumo. Spektrin toisessa päässä ovat täysin läpäisevien haitallisten mutaatioiden aiheuttamat sairaudet ja toisessa päässä puhtaasti ympäristötekijöiden aiheuttamat sairaudet. Näiden kahden ääripään väliin sijoittuvat epätäydellisesti penetroituvat ja polygeeniset sairaudet, jolloin siirtymä puhtaasti geneettisistä sairauksista monitekijäisiin sairauksiin on sujuva. Heterogeenisuus on joidenkin monimutkaisten ominaisuuksien yhteinen nimittäjä, ja sitä voidaan pitää tärkeimpänä esteenä, joka on voitettava tutkimuksissa, joilla pyritään löytämään altistavia geenejä. Biomarkkereiden tai erityisten kliinisten piirteiden tunnistaminen mahdollistaisi tapausten osittamisen homogeenisempiin ryhmiin ja helpottaisi siten monimutkaisen heterogeenisuuden selvittämistä. Tässä yhteydessä neljään raportoituun RLS-lociin yhdistettyjen RLS-perheiden tarkassa tarkastelussa ei havaittu mitään erityisiä kliinisiä piirteitä tai mittauksia, jotka mahdollistaisivat näytteiden stratifioinnin, lukuun ottamatta korkeita PLMS-mittauksia italialaisessa RLS-perheessä, joka oli yhdistetty kromosomiin 14q31,38,40, ja ranskalais-kanadalaisissa perheissä, jotka olivat yhdistettyinä kromosomiin 12.84 Varhaisen AO:n on arveltu vaikuttavan geneettisiin RLS:n muotoihin,28,49,55 mutta tämän kliinisen parametrin ei ole toistaiseksi raportoitu olevan virallisesti yhdistetty linkkitystapaanalyyseihin.