L’hyperchromicité est l’augmentation de l’absorbance (densité optique) d’un matériau. L’exemple le plus célèbre est l’hyperchromicité d’un ADN qui se produit lorsque le duplex d’ADN est dénaturé. L’absorption des UV augmente lorsque les deux brins d’ADN sont séparés, soit par la chaleur, soit par l’ajout d’un dénaturant, soit par la diminution du pH. L’inverse, une diminution de l’absorbance est appelée hypochromie.
Connaissances supplémentaires recommandées
La dénaturation de l’ADN par la chaleur, également appelée fusion, entraîne le déroulement de la structure en double hélice pour former un ADN simple brin. Lorsque l’ADN en solution est chauffé au-dessus de sa température de fusion (généralement plus de 80 oC), l’ADN double brin se déroule pour former de l’ADN simple brin. Les bases ne sont plus empilées et peuvent donc absorber davantage de lumière. Dans leur état natif, les bases de l’ADN absorbent la lumière dans la région des 260 nm de longueur d’onde. Lorsque les bases se désempilent, la longueur d’onde d’absorbance maximale ne change pas, mais la quantité absorbée augmente de 30 à 40 %.
L’hyperchromicité peut être utilisée pour suivre l’état de l’ADN lorsque la température change. La température de transition/fusion (Tm) est la température où l’absorbance de la lumière UV est de 50% entre le maximum et le minimum, c’est-à-dire où 50% de l’ADN est dénaturé.
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