Nuovi metaboliti drostanolone nelle urine umane da cromatografia liquida time-of-flight tandem spettrometria di massa e loro applicazione per il controllo del doping

Drostanolone è uno degli steroidi anabolizzanti androgeni più frequentemente rilevato in analisi di controllo del doping. Qui, abbiamo studiato drostanolone profili metabolici urinari utilizzando cromatografia liquida quadruplo tempo di spettrometria di massa di volo (LC-QTOF-MS) in modalità full scan e mirata MS/MS con misurazione di massa accurata. Il farmaco è stato somministrato a un volontario maschio sano e l’estrazione liquido-liquido con iniezione diretta sono stati utilizzati per analizzare i campioni di urina. Picchi cromatografici per potenziali metaboliti sono stati identificati con il teorico – come uno ione bersaglio in un esperimento di scansione completa e reali ioni deprotonati sono stati analizzati in modalità MS/MS mirata. Undici metaboliti tra cui cinque nuovi solfati, cinque coniugati glucuronide e un metabolita libero sono stati confermati per drostanolone. A causa dell’assenza di ioni frammento utile per illustrare la struttura dell’anello steroideo di drostanolone fase II metaboliti, gas cromatografia spettrometria di massa (GC-MS) è stato utilizzato per ottenere dettagli strutturali del trimetilsililato fase I metabolita rilasciato dopo idrolisi enzimatica e una struttura potenziale è stato proposto utilizzando un approccio combinato MS. I tempi di rilevamento dei metaboliti sono stati registrati e S4 (2α-metil-5α-androstan-17-one-6β-ol-3α-solfato) e G1 (2α-metil-5α-androstan-17-one-3α-glucuronide) sono stati ritenuti nuovi potenziali biomarcatori per l’abuso di drostanolone che possono essere rilevati fino a 24 giorni tramite estrazione liquido-liquido e 7 giorni tramite analisi a iniezione diretta dopo l’iniezione intramuscolare. S4 e G1 sono stati rilevati anche in due campioni di urina di routine positivi al drostanolone.