RESULTS AND DISCUSSION:
子牛A（エピソード1）の病理検査で大腿部の骨格筋の蒼白、心拡張、腹水と水頭症が確認されました。 子牛B（エピソード1）では、右心室の拡張があり、左心室壁と後乳頭筋の心筋に白っぽい筋と境界の悪い部分がありました。 軽・中等度の胸水、腹水、心嚢水がみられた。 また、中等度の肝腫大を認め、肝臓にはびまん性のやや強調された小葉模様があった。 組織学的に両子牛に多発性の心筋変性と筋原繊維の重度の壊死が認められ、A子牛の心筋には組織球性の炎症浸潤が伴っていた。B子牛の表層臀筋には多発性の筋原繊維の変性と炎症が見られた。 A子牛とB子牛の肝臓では、肝細胞の変性と壊死を伴う重度の中心葉のうっ血が見られた。 C子牛（エピソード2）の剖検では、心臓は両側の心室拡張により丸みを帯び（図1A）、心室の心筋の約30%が広範囲に蒼白になっており（図1B）、中程度の心膜胞がありました。 肝臓はびまん性の起伏のある不規則な被膜を有し、肝実質の小葉模様が顕著に強調されていた（ナツメグ肝、図1D）。肺は葉間隔の拡張を伴う重度のびまん性の両側浮腫とうっ血が見られた（図1E）。 心臓と骨格筋には、筋小胞体の鉱化を伴う多相性の多発性分節性変性と壊死が見られた（図1C）。 心筋の線維化と組織球性心筋炎が見られた。 肝臓では、まれに肝細胞の壊死と肝索の萎縮を伴う中心葉と中帯の出血、および周囲に線維化がみられた。 肺の病変は、肺胞空間にヘモジデリンを含んだマクロファージが浸潤するなど、子牛A、Bと同様であった（図1F）＜9772＞＜7722＞＜9782＞＜390＞図1 A：子牛C。右心室の拡張により心臓は丸みを帯びた形状をしている。 B：子牛C 心臓、右心室自由壁の横断面は、心内膜下（右側）にびまん性の無分別な帯状の蒼白を示す。 C：子牛C.心臓、2つの心筋細胞（中央）の分節化した筋小胞体鉱化。 HE染色。 D：子牛 C. 肝実質の断面では、心不全に続発する慢性肝充血に典型的な小葉パターンのびまん性増強が認められる（「ナツメグ肝」）。 E：子牛 C：小葉間隔の著しい拡大を伴う重度のびまん性肺水腫。 F：子牛 C. 肺、肺胞マクロファージは細胞質内のヘモシデリン顆粒を含み、「心不全細胞」として知られている（中央）。 HE染色。
Table 2 エピソード1の無症状子牛19頭における血漿中のグルタチオンペルオキシダーゼ活性。 参考値 MAAS & VALBERG, 2015.
| Calf | GPx activity (U/gHb/min) |
| F | 29 |
| g | 31 |
| h | 31 |
| i | 39 |
| 31j | 26 |
| k | 38 |
| l | 31 |
| m | 29 |
| n | 47 |
| o | 42 |
| p | 36 |
| q | 32 |
| r | 32 |
| s | 30 |
| t | 24 |
| u | 29 |
| v | 22 |
| T | 24 | 32 |
| X | 33 |
| 基準値 |
両回とも患仔の臨床症状および病理所見は WMD に相当していた． 剖検された3頭すべての子牛の肝Seが欠乏していたことから、この状態が確認された。 さらに、エピソード1の無症状の子牛では、血漿GPx活性の低下から不顕性Se欠乏症が疑われた（MAAS & VALBERG, 2015）。 ビタミンE欠乏症が大量破壊兵器に寄与することはよく知られているが、これらの症例ではビタミンE状態は評価されなかった。 両群とも、心毒性物質や植物への曝露歴はなかった。
WMD の提示には、年齢が重要な役割を果たす。 新生子牛のセレンと銅の組織濃度は胎盤と初乳/ミルクの移動に依存している (ABDELRAHMAN & KINCAID, 1992; ENJALBERT et al., 1999)。 先天性WMDは、妊娠中に低Se飼料を与えたダムから生まれた子牛で報告されている（ABUTARBUSH & RADOSTITS, 2003）。 さらに、生後4ヶ月までの成長の早い子牛は、しばしばWMDに高い感受性を示す（MAAS & VALBERG, 2015）。 この肉牛群の子牛は生後20日以内であり、生後4日の新生児が罹患していたことから、この牛群ではSeとCuが欠乏または臨界値で生まれた子牛がいたのではないかと推測された。 このことから、妊娠牛や幼若子牛に与える飼料は、微量栄養素を十分に摂取できるように適切にバランスする必要があることが強調された。
WMDの臨床症状は、主に影響を受ける筋骨格の種類によって異なる場合がある。 心筋が侵された場合、臨床症状の発現はしばしば急性であり、突然の衰弱、抑うつ、呼吸困難、衰弱、そして<24時間での死亡を伴う。 骨格筋が主に侵された場合、臨床経過は亜急性から慢性に及ぶことが多く、脱力、振戦、筋硬直、遷延性除脈などが特徴である。 今回紹介した症例では、A〜Bの子牛は亜急性、Cは過急性の経過であったが、肉眼および顕微鏡的病変から、全例で慢性経過であることが明らかであった。
死後検査では、骨格筋や心筋に多数の淡色部が観察され、心病変は主に左心室壁と心室間中隔に発生する(KENNEDY et al., 1987)。 心筋病変のためにうっ血性心不全が起こり、心室は拡張し、心嚢水、胸水、腹水、肺水腫、慢性肝充血も報告されており (MAAS & VALBERG, 2015) 、本研究のすべての剖検子牛にみられた。 顕微鏡的には、WMDは、心筋細胞および/または骨格筋細胞の変性、壊死および無機化によって特徴付けられる。 筋原線維は，鉱化を伴う，または伴わない変性および壊死の多巣性領域を示し，主にマクロファージによる非支給性炎症，また慢性例では修復反応としての線維化が見られた（COOPER & VALENTINE，2016）。 本報告では3頭すべての子牛に見られた慢性心不全に典型的な慢性活動性肺・肝病変は、心筋線維化を伴う心筋の変性・壊死病変が主因と考えられた。
我々は、WMDがアルゼンチンとウルグアイの肉牛と乳牛における子牛死亡による農場内生産損失と関連していると結論づけた。 これらの損失の大きさを評価し、臨床的および潜在的な微量栄養素およびミネラルの欠乏が南米の家畜の健康および生産に与える影響をより良く理解するために、さらなる調査が必要である。