Novos metabolitos de drostanolona na urina humana por cromatografia líquida espectrometria de massa tandem e sua aplicação para controle de doping

Drostanolona é um dos esteróides anabólicos androgênicos mais freqüentemente detectados na análise de controle de doping. Aqui, estudamos os perfis metabólicos urinários de drostanolona usando cromatografia líquida com tempo quádruplo da espectrometria de massa de voo (LC-QTOF-MS) nos modos de varredura completa e MS/MS alvo com medição de massa precisa. A droga foi administrada a um voluntário masculino saudável e a extração líquido-líquido juntamente com a injeção direta foram usadas para analisar amostras de urina. Os picos cromatográficos para potenciais metabolitos foram identificados com a teoria – como um íon alvo em um experimento de varredura completa e íons desprotonados reais foram analisados no modo MS/MS alvo. Onze metabólitos incluindo cinco novos sulfatos, cinco glucuronídeos conjugados e um metabólito livre foram confirmados para a drostanolona. Devido à ausência de íons fragmentos úteis para ilustrar a estrutura do anel esteróide dos metabólitos da fase II da drostanolona, a espectrometria de massa por cromatografia gasosa (GC-MS) foi utilizada para obter detalhes estruturais do metabólito trimetílico da fase I liberado após a hidrólise enzimática e uma estrutura potencial foi proposta usando uma abordagem combinada de MS. Os tempos de detecção de metabolitos foram registrados e o S4 (2α-metil-5α-androstan-17-one-6β-ol-3α-sulfato) e o G1 (2α-metil-5α-androstan-17-one-3α-glucuronida) foram considerados novos biomarcadores potenciais para o mau uso da drostanolona, que podem ser detectados até 24 dias por extração líquido-líquido e 7 dias por análise de injeção direta após injeção intramuscular. S4 e G1 também foram detectados em duas amostras de urina de rotina positivas para a dosagem de drostanolona.