Caso 1
Uma paciente com câncer esofágico que foi diagnosticada como S. haliotis inflamação pulmonar.
Um paciente de 68 anos de idade do sexo masculino foi internado no hospital popular da cidade de Liaocheng, China, em 24 de julho de 2016, por causa de “hematemese por 4 horas”. Ele tinha sido diagnosticado com a operação de câncer de esôfago por mais de 2 anos. Seus exames físicos admitidos foram temperatura corporal de 36,3 °C, freqüência de pulso 92 batimentos/min, respiração de 22 vezes/min e pressão arterial 135/80 mmHg. Aumento não palpável dos gânglios linfáticos bilaterais do pescoço e supraclavicular, traquéia no meio, simetria peitoral, cicatrizes visíveis no tórax direito, som nítido de percussão no duplo pulmão, auscultação de som de respiração grosseira, ausência de escamas secas e úmidas, ritmo regular, percussão sem dor na região renal, negativo para mudança de entorpecimento e sons intestinais de 3 vezes/min. Seu diagnóstico de admissão foi de câncer esofágico após a operação e hipertensão arterial. Na admissão, os exames auxiliares foram realizados para determinar a origem da hematêmese. A gastroscopia sem dor foi realizada, mas nenhuma anormalidade óbvia foi observada. O exame broncoscópico indolor revelou segmento basal posterior de hemorragia do lobo inferior esquerdo. A patologia da escovagem não indicou células tumorais óbvias. A tomografia computadorizada de aumento do tórax e abdômen mostrou que ele teve cirurgia do esôfago, bronquite e enfisema, lobo médio dos nódulos do pulmão direito, lesões intersticiais lobo superior direito e lobo inferior esquerdo e o lobo inferior da inflamação do pulmão esquerdo. Ele recebeu medicamentos (3 g de cefoperazona/sulbactam foi administrado duas vezes por dia durante 6 dias) e terapia de anticâncer, anti-inflamatório, reidratação e hemostasia. Após seis dias de tratamento, seus sintomas melhoraram e o paciente recebeu alta do hospital.
O líquido de lavagem broncoalveolar (BALF) foi coletado quando recebeu exame broncoscópico indolor e o número de células estava acima de 104 ufc/ml. A amostra foi inoculada em meio de ágar sangue para cultura bacteriana. Estirpes de diferentes características fenotípicas em placas de sangue foram isoladas e identificadas como algas S., Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae pelo sistema VITEK 2 usando o cartão ID-GN (boiMérieux). Como apenas duas espécies de Shewanella, S. putrefaciens e S. alga, foram registradas no banco de dados do sistema VITEK 2, a sequência do gene 16S rRNA foi amplificada por uma PCR descrita anteriormente . O produto PCR foi sequenciado e a sequência nucleotídica foi depositada no GenBank, sob o número de acesso de MF589233. A análise BLAST da sequência do gene 16S rRNA no GenBank mostrou uma semelhança de 99,0% com a estirpe do tipo S. haliotis DW01 (números de acesso NR_117770.1). Outras análises filogenéticas com todas as sequências de tipos de espécies de Shewanella disponíveis no banco de dados do GenBank, confirmaram que a cepa foi identificada como espécie de S. haliotis (LC2016-1 na Fig. 1).
Árvore filogenética construída pelo método de união vizinha baseada nas sequências nucleotídicas do gene 16S rRNA. A árvore filogenética foi construída a partir de um alinhamento de 1427 nt e todas as linhagens conhecidas da espécie Shewanella foram incluídas. Os números nos nós indicaram valores de bootstrap (percentagem de 1000 réplicas). Barra, 10 substituições por posição de nucleotídeos. Fontes arrojadas indicaram as cepas dos casos I e II. Números de acesso ao GenBank de 16S rRNA seqüências de genes estavam entre parênteses. O triângulo preto consistia em cinquenta e quatro espécies de Shewanella. Os nomes das espécies e os números de acesso ao GenBank das sequências do gene 16S rRNA foram listados no arquivo adicional 1: Tabela S1
Para confirmar ainda mais a composição e riqueza da comunidade bacteriana do BALF, a amostra foi submetida à sequenciação de 16S rRNA amplicon . O resultado indicou que a composição da comunidade bacteriana incluiu gêneros de Shewanella (88,34%), Escherichia (11,11%) e Streptococcus (0,38%), et al., enquanto a maioria dos gêneros foi Shewanella.
Testes de susceptibilidade a antibióticos foram realizados pelo método de microdiluição em caldo Mueller-Hinton. A cepa foi susceptível à piperacilina/tazobactam (concentração inibitória mínima, MIC: 8 μg/ml), ceftazidima (1 μg/ml), cefepime (1 μg/ml), amikacina (2 μg/ml), gentamicina (1 μg/ml), imipenem (4 μg/ml), meropenem (4 μg/ml), mas era resistente à ciprofloxacina (8 μg/ml) e levofloxacina (8 μg/ml).
Caso 2
Uma paciente com câncer gástrico diagnosticada como bacteremia por algas S.
Um homem de 56 anos de idade foi internado no hospital de pessoas da cidade de Liaocheng, China, em 6 de outubro de 2016, devido ao “desconforto da dor abdominal superior por 1 mês”. Seu exame físico admitido incluiu temperatura corporal de 36,1 graus, freqüência de pulso de 72 batimentos/min, respiração 18 vezes/min e pressão arterial 140/90 mmHg. Detecção de aumento não palpável do pescoço bilateral e linfonodos supraclaviculares, abdômen plano, não foram observadas ondas gastrointestinais ou peristálticas. Músculos abdominais moles, sensibilidade leve no abdômen superior e nenhuma dor evidente de rebote foram relatados. O fígado e o baço não tocaram debaixo da costela e não foi descoberta massa palpável. Negativo para o entorpecimento das mudanças, sons intestinais normais e nenhuma anormalidade do exame rectal foi detectada. O endoscópio sugeriu lesões visíveis de úlcera no coração envolvendo fundo gástrico e corpo gástrico. Os resultados patológicos indicaram adenocarcinoma. Seus diagnósticos de admissão foram câncer gástrico e hipertensão arterial.
Na admissão, o exame auxiliar foi realizado em 9 de outubro de 2016. A laparoscopia indicou que ele estava na fase tardia de tumores sem ressecção radical. Em seguida, recebeu quimioterapia intravenosa e intraperitoneal, seguida de supressão grave da medula óssea com células sanguíneas e plaquetas significativamente inferiores ao normal. Recebeu tratamento adicional de anti-infecção, suporte nutricional, reidratação, granulopoiese estimulante e tratamento sintomático. Em 26 de outubro de 2016, os pacientes apresentaram falta de ar, freqüência cardíaca e outros sintomas com respiração pulmonar áspera e sem escamas, membros frios. Ele foi considerado a existência de choque séptico. Ele recebeu ventilação mecânica não invasiva e expansão de líquidos, colóide, produtos de transfusão de sangue, anti-infecção (1 g de imipenem foi administrado a cada 8 h por 7 dias), manter a circulação, supressão de ácidos, proteção hepática, suporte nutricional, manutenção do equilíbrio hídrico e eletrolítico, monitoramento da pressão arterial, freqüência cardíaca, função respiratória, volume horário de urina e sangramento. O paciente teve infecção grave, e a presença de síndrome de disfunção de múltiplos órgãos (respiração, circulação, gastrointestinal, sangue e rim). O paciente e seus familiares necessitaram de alta automática para os cuidados hospitalares. Seu diagnóstico de corrimento foi síndrome de disfunção de múltiplos órgãos (respiratório, circulatório, gastrointestinal, sangue e rim), câncer gástrico e hipertensão arterial.
Após o aparecimento do choque séptico, sua hemocultura foi amostrada para separar as bactérias. O crescimento microbiano foi detectado tanto em garrafas anaeróbias quanto aeróbias e o tempo de relato positivo foi de 8,1 e 11,9 h, respectivamente. Ambas as garrafas produziram um bacilo Gram-negativo uniforme. Após 24 h de incubação, as colônias hemolíticas, oxidase-positivas amarelas cresceram em ágar sangue. A cepa foi identificada como S. putrefaciens pelo sistema VITEK 2 usando o cartão ID-GN (boiMérieux). A sequência genética 16S rRNA da estirpe tinha sido depositada no GenBank (número de acesso: MF589234). A análise BLAST no GenBank mostrou uma semelhança de 100,0% com a cepa S. upenei VITVAGJ (números de acesso KP090164.1). Outras análises filogenéticas com todas as sequências de espécies de Shewanella disponíveis na base de dados do GenBank, confirmaram que a estirpe pertencia às espécies de S. upenei (LC2016-5 na Fig. 1). No dia da colheita da amostra de sangue, seu líquido de drenagem peritoneal também foi coletado e cultivado usando os mesmos métodos de identificação, e os resultados da identificação bacteriana e da sensibilidade às drogas foram consistentes com os do sangue.
Testes de susceptibilidade a antibióticos foram realizados pelo método de microdiluição no caldo Mueller-Hinton. A cepa foi susceptível ao aztreonam (1 μg/ml), ceftazidima (1 μg/ml), cefepima (1 μg/ml), amikacin (2 μg/ml), gentamicina (1 μg/ml) e levofloxacina (1 μg/ml), mas era intermediário para imipenem (8 μg/ml), piperacilina/tazobactam (64 μg/ml) e ciprofloxacina (2 μg/ml).