Fig. 1 ilustra uma superfície óssea tricromada de Masson com uma superfície osteóide ainda não mineralizada em azul e osso mineralizado em vermelho, juntamente com uma dupla secção adjacente corada para CD34 e actina muscular lisa (SMA) usando IHC. A camada de osso prumo formando osteoblastos na superfície óssea é coberta com uma camada de células alongadas de SMA+ fibro-osteoblastos alongados. Em humanos adultos, o osso não está a ser construído, em vez disso o osso existente está a ser primeiro corroído e depois reconstruído durante um processo denominado remodelação óssea (Parfitt, 1994). Em indivíduos normais e em pacientes com hiperparatiroidismo primário (PHPT), o dossel cobre a grande maioria dos locais de remodelação óssea (Hauge et al., 2001; Kristensen et al., 2013, 2014). Já em publicações dos anos 90, foi sugerido que as folhas celulares multicamadas acima das superfícies de formação óssea em pacientes com hiperparatiroidismo secundário consistiam de células de linhagem osteoblástica (Bianco e Bonucci, 1991), enquanto Ellen Hauge e colegas em 2001 mostraram que os locais de remodelação de pacientes com PHPT têm uma cobertura de copa muito extensa (Hauge et al., 2001). Pelo contrário, a cobertura com células do dossel é diminuída em mulheres com osteoporose pós-menopausa e em pacientes com mieloma múltiplo ou síndrome de Cushing (Andersen et al., 2014; Hinge et al., 2015; Jensen et al., 2012). É provável que as células do dossel tenham origem nas células do envelope da medula óssea mesenquimatosa (BME). As células BME são posicionadas acima de superfícies quiescentes e formam uma camada celular extremamente atenuada que é dificilmente visível por microscopia óptica, mas pode ser visualizada por microscopia electrónica (EM) (Kristensen et al., 2014). As células BME e as células do dossel compartimentam a superfície óssea da medula óssea adjacente, e é provável que compreendam uma importante população de progenitores osteoblastos (Kristensen et al., 2014). Em comparação com os osteoblastos formadores de osso, as células da copa pré-osteoblástica têm núcleos alongados e extensões celulares longas, morfologicamente semelhantes aos fibroblastos. Elas apresentam coloração positiva para marcadores osteoblastos como osterix e runx2, mas também para marcadores que estão relacionados a nervos, células musculares lisas, pericitos e fibroblastos como CD56 (NCAM), P3NP e SMA (Andersen et al., 2013; Hinge et al., 2015; Jensen et al., 2012; Kristensen et al., 2013, 2014). De notar que osterix, runx2 e CD56 também marcam as células da linhagem osteoblástica nas superfícies erodidas, as células reversas e os osteoblastos formadores de osso. É muito provável que as células BME e canopy desempenhem um papel desconhecido na regulação das células estaminais hematopoiéticas e progenitoras (HSPCs). Em primeiro lugar, a sua posição coincide com a suposta interacção parácrina entre as células do dossel e as células da medula óssea, uma vez que o dossel cobre os osteoclastos e as células da linhagem osteoblastos na superfície óssea. Em segundo lugar, alguns pacientes com PHPT desenvolvem anemia possivelmente por causa da fibrose da medula óssea (Bhadada et al., 2009). Em terceiro lugar, há 30 anos um estudo mostrou que o alvo ósseo predominante do hormônio paratireóide (PTH) não era o osteoblasto maduro, mas uma suposta célula pré-osteoblástica (Rouleau et al., 1988), e mais recentemente o receptor PTH 1 (PTHR1) foi mostrado em células das copas das crianças com doença renal grave, e a cobertura de copas excepcionalmente multicamadas correlacionada com o nível de PTH (Pereira et al., 2016). Em quarto lugar, estudos pré-clínicos e clínicos mostraram um papel regulatório do PTH nas células-tronco hematopoéticas (HSCs) e no nicho HSC (Brunner et al., 2007; Yu et al., 2014; Calvi et al., 2003), e um estudo pré-clínico mostrou que o tratamento com PTH após transplante de medula óssea resultou em aumento da gravação de HSC (Adams et al., 2007). Entretanto, pacientes tratados com PTH durante um período de 28 dias após duplo transplante de sangue do cordão umbilical não obtiveram uma recuperação mais rápida ou melhor do hemograma (Ballen et al., 2012). Ainda assim, as células do dossel fibro-osteoblástico, e possivelmente também seus precursores as células BME, são o principal alvo celular do PTH e a incapacidade de transferir os efeitos do tratamento com PTH do pré-clínico para estudos clínicos não descarta a possibilidade de um efeito, mas enfatiza algumas das dificuldades em transferir os achados de camundongos jovens com modelagem óssea rápida para humanos idosos com remodelação óssea lenta.
Fig. 1. Visualização de uma superfície de formação óssea. Duas imagens obtidas em cortes adjacentes que foram coradas usando o tricromio de Masson modificado (A) ou coradas duplamente para CD34 e SMA usando IHC (B). As linhas pontilhadas inferiores indicam o contorno da superfície óssea, enquanto as superiores indicam o contorno da copa. A superfície osteóide não mineralizada recém formada é azul, enquanto que o osso mineralizado é vermelho (A). Note que apenas as células fibro-osteoblásticas alongadas do dossel apresentam coloração positiva para SMA, enquanto o osso mais prumo formando osteoblastos apresenta coloração negativa (B). As setas amarelas e pretas indicam um capilar. Barras de escamas = 25 μm. Os cortes são obtidos a partir de uma biópsia de medula óssea em parafina de uma voluntária saudável de 57 anos de idade (Projeto de Ética em Pesquisa Biomédica do Comitê Nacional Dinamarquês ID # S-20110112).