Nuevos metabolitos de drostanolona en orina humana mediante espectrometría de masas de tiempo de vuelo por cromatografía líquida y su aplicación para el control del dopaje

La drostanolona es uno de los esteroides anabólicos androgénicos más frecuentemente detectados en los análisis de control del dopaje. Aquí, estudiamos los perfiles metabólicos urinarios de drostanolona utilizando la espectrometría de masas de tiempo de vuelo cuádruple de cromatografía líquida (LC-QTOF-MS) en los modos de barrido completo y MS/MS dirigido con una medición de masa precisa. Se administró el fármaco a un voluntario varón sano y se utilizó la extracción líquido-líquido junto con la inyección directa para analizar las muestras de orina. Los picos cromatográficos de los posibles metabolitos se identificaron con el ion teórico como objetivo en un experimento de barrido completo y los iones desprotonados reales se analizaron en el modo MS/MS dirigido. Se confirmaron once metabolitos para la drostanolona, incluidos cinco nuevos sulfatos, cinco conjugados de glucurónidos y un metabolito libre. Debido a la ausencia de iones de fragmentos útiles para ilustrar la estructura del anillo esteroide de los metabolitos de fase II de la drostanolona, se utilizó la espectrometría de masas por cromatografía de gases (GC-MS) para obtener detalles estructurales del metabolito de fase I trimetilsililado liberado tras la hidrólisis enzimática y se propuso una estructura potencial utilizando un enfoque combinado de MS. Se registraron los tiempos de detección de los metabolitos y se pensó que S4 (2α-metil-5α-androstan-17-one-6β-ol-3α-sulfato) y G1 (2α-metil-5α-androstan-17-one-3α-glucurónido) son nuevos biomarcadores potenciales del uso indebido de drostanolona que pueden detectarse hasta 24 días mediante extracción líquido-líquido y 7 días mediante análisis de inyección directa tras la inyección intramuscular. También se detectaron S4 y G1 en dos muestras de orina de rutina positivas a drostanolona.