Tarkoitus: Tämän tutkimuksen tavoitteena oli selvittää neem-öljyn rooli ja vaikutusmekanismi yhdynnän jälkeisen hedelmällisyyden estäjänä hiirellä.
Menetelmät: Naarashiirille injektoitiin neem-öljyä (20 tai 40 µl) kirurgisesti kumpaankin kohdun sarveen päivänä 2 postcoitum (kk). Kunkin hiiren molemmat kohdunsarvet ruiskutettiin. Arachisöljy toimi vertailuaineena. Raskauden onnistuminen määritettiin istutettujen alkioiden lukumäärän perusteella päivänä 8 kk ja kohdussa olevien elävien sikiöiden lukumäärän perusteella päivänä 18 kk. Transformoiva kasvutekijä-α (TGFα), epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja epidermaalisen kasvutekijän reseptori (EGFR) immunolokalisoitiin kohdun parafiiniin sulautetuissa kohdunleikkeissä päivänä 5 kk:n kello 0600. Istuttamattomat alkiot arvioitiin kohdunsuulla päivänä 5 kk klo 2000. Kohdun eritteet arvioitiin leukosyyttien infiltraation varalta päivänä 4-8 kk.
Tulokset: Implantaatiopaikkojen määrä päivänä 8 kk ja elävien sikiöiden määrä päivänä 18 kk olivat alhaisemmat neem-öljyllä käsitellyillä eläimillä verrattuna vastaaviin kontrollieläimiin molemmilla neem-öljypitoisuuksilla (20 ja 40 µl/kohdun sarvi). Neem-öljy aiheutti myös joidenkin alkioiden resorptiota päivän 8 kpl ja päivän 18 kpl välillä. Neemiöljyllä käsitellyillä hiirillä EGFR-immunovärjäytyminen väheni luminaalisessa ja rauhasepiteelissä ja lisääntyi stroomassa määritettynä kello 6.00 päivänä 5 kk. Neem-öljyllä käsiteltyjen hiirten kohdun eritteissä näkyi massiivista leukosyytti-infiltraatiota päivästä 4 päivään 6 kk. Istuttamattomia preimplantaatioalkioita, jotka olivat alikehittyneitä, degeneroituneita tai blastokystavaiheessa, saatiin talteen kohdunsuusta sen jälkeen, kun neemöljyllä käsiteltyjen eläinten kohdunsuusta oli huuhdeltu päivän 5 kk:n aikana klo 2000. Useissa talteen otetuissa istuttamattomissa alkioissa leukosyytit olivat kiinnittyneet suoraan niiden zona pellucidaan. Uskotaan, että näiden leukosyyttien eritteet saattavat olla vastuussa varhaisten alkioiden alikehittyneisyydestä ja siten implantaation estymisestä. Näiden leukosyyttien ja niiden eritteiden tarkkaa vuorovaikutusta varhaisten alkioiden kanssa tutkitaan parhaillaan.
Tulokset: Postkoitaalinen kohdunsisäinen hoito neemiöljyllä preimplantaatiovaiheessa aiheuttaa hiirellä hedelmällisyyden estymisen alentamalla EGFR:n lokalisaatiota luminaalisessa ja rauhasepiteelissä, aiheuttamalla massiivista leukosyyttien infiltraatiota kohtuun, degeneroimalla varhaisia alkioita ja aiheuttamalla implantaation jälkeisiä alkion resorptioita kohdussa. Neem-öljyn mahdollista vaikutusmekanismia käsitellään.