Hiperkromitás

A hiperkromitás az anyag abszorbanciájának (optikai sűrűségének) növekedése. A leghíresebb példa a DNS hiperchromicitása, amely a DNS-duplex denaturálásakor lép fel. Az UV-abszorpció megnő, amikor a két egyszálas DNS-szálat szétválasztják, akár hővel, akár denaturálószer hozzáadásával, akár a pH-szint csökkentésével. Ennek ellenkezőjét, az abszorbancia csökkenését hipokromitásnak nevezzük.

Kiegészítő ajánlott ismeretek

A DNS hődenaturációja, más néven olvadása során a kettős spirálszerkezet feloldódik, és egyszálú DNS alakul ki. Ha az oldatban lévő DNS-t olvadási hőmérséklete fölé (általában 80 oC fölé) melegítjük, a kettős szálú DNS kitekeredik, és egyszálú DNS-t alkot. A bázisok feloldódnak, és így több fényt tudnak elnyelni. A DNS bázisai natív állapotukban a 260 nm-es hullámhosszúságú tartományban nyelik el a fényt. Amikor a bázisok feloldódnak, a maximális abszorpció hullámhossza nem változik, de az elnyelt mennyiség 30-40%-kal nő.

A hiperkromitás felhasználható a DNS állapotának nyomon követésére a hőmérséklet változásával. Az átmeneti/olvadási hőmérséklet (Tm) az a hőmérséklet, ahol az UV-fény abszorpciója 50%-ban a maximum és a minimum között van, azaz ahol a DNS 50%-a denaturálódik.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.