Esterilidade é a chave. Se sua impressão de esporos estiver contaminada ou se você introduzir contaminação na seringa de esporos, você terá dificuldade mais tarde no processo. Idealmente, não deve haver ventoinhas a soprar ou correntes de ar. Você deve limpar cuidadosamente a área onde você estará trabalhando e certificar-se de que tudo está arrumado.
Materiais necessários:
impressão de esporos
seringa de 10 cc. com agulha comprida Onde encontrar
vidro de tiro
vidro regular
cânula de café
acendedor de cigarro
faca de X-Acto ou faca de bife afiada
Forno de microondas
Coisas seriais precisam de ser feitas. Primeiro, precisamos de esterilizar um copo de shot para misturar facilmente a solução de esporos e precisamos de esterilizar uma seringa para segurar a solução. Também precisamos de um pouco de água estéril para suspender os esporos. O seguinte procedimento irá realizar tudo isto.
Encha uma caneca de café com água e coloque um copo de shot dentro da caneca de café. Certifique-se de que o copo de shot está completamente submerso. Coloque a caneca de café no microondas e deixe a água ferver completamente durante 10 minutos. Não é necessário ferver violentamente. Ajuste o nível de calor do forno de microondas para evitar a perda de demasiada água, se necessário.
Remover o copo de shot e esvaziar o excesso de água do copo de shot. Coloque outro copo sobre o copo de shot. Isto evitará que contaminantes nascidos do ar se depositem no copo de injeção enquanto você espera que o copo de injeção e a água na seringa de esporos esfriem.
Encha a seringa com água quente da caneca. Ejete a água quente e repita várias vezes. Isto assegurará que o interior da seringa e a agulha estejam limpos e esterilizados. Isto é especialmente importante se você estiver usando uma seringa de uma cultura anterior. Quando a agulha é inserida no substrato, é possível obter nutrientes no interior da agulha e que a contaminação cresça. A última vez que se encher a seringa com água quente, não se deve purgá-la. Deixe-a sentar-se na seringa até estar fria. Isto é útil por duas razões. Primeiro, o calor contínuo da água ainda pode funcionar para eliminar quaisquer contaminantes remanescentes. Em segundo lugar, quando a água estiver fria, pode ser usada como água esterilizada necessária para encher a seringa. Certifique-se de que nada toque na agulha da seringa.
Os esporos dos cogumelos Psilocybe serão mortos se entrarem em contacto com algo demasiado quente. Tens de esperar que o copo de shot e a seringa de esporos estejam à temperatura ambiente. Quando for seguro prosseguir, use o isqueiro para queimar e esterilizar a faca X-Acto e a agulha da seringa. Deixe a lâmina da faca esfriar, mas certifique-se de que ela não toque em nada. Quando estiver fria, abra cuidadosamente a impressão dos esporos e raspe uma mancha de esporos no copo de injeção. Uma mancha de 1/4 de polegada por 1/4 de polegada é mais que suficiente para uma seringa de 10 cc de esporos. Use a agulha da seringa para misturar os esporos em algumas gotas de água. Normalmente, sobrarão algumas gotas no copo de shot a partir do momento em que o esvaziar. Caso contrário, você pode obter as gotas da seringa. Mexa a mancha de esporos até que eles estejam bem quebrados e ‘dissolvidos’ na água. Purgar a água da seringa para dentro do copo de injeção. Puxar a água de volta para dentro da seringa, tendo a certeza de que também vai sugar os esporos. Faça isto mais uma ou duas vezes para se certificar que os esporos estão bem misturados na seringa de esporos. Muitas vezes, são necessárias várias tentativas para que os esporos se partam completamente e se misturem bem.
Se os esporos na impressão foram secos e não estão frescos, é melhor esperar seis horas para usar a seringa de esporos. Os esporos precisam de ser reidratados. Se estiver com pressa, os esporos ainda podem re-hidratar nos vasos de cultura.