Figura 1 ilustrează o suprafață osoasă colorată cu tricromul lui Masson, cu o suprafață osteoidă nou formată, încă nemineralizată, în albastru și os mineralizat în roșu, împreună cu o secțiune adiacentă dublu colorată pentru CD34 și actina musculară netedă (SMA) folosind IHC. Stratul de osteoblaste care formează osul plămădit de pe suprafața osoasă este acoperit cu un strat de celule de baldachin alungit fibro-osteoblastic SMA+. La omul adult, osul nu se construiește, în schimb, osul existent este mai întâi erodat și apoi reconstruit în timpul unui proces numit remodelare osoasă (Parfitt, 1994). La indivizii normali și la pacienții cu hiperparatiroidism primar (PHPT), baldachinul acoperă marea majoritate a situsurilor de remodelare osoasă (Hauge et al., 2001; Kristensen et al., 2013, 2014). Deja în publicații din anii 1990 s-a sugerat că foliile celulare multistratificate de deasupra suprafețelor de formare a oaselor la pacienții cu hiperparatiroidism secundar constau în celule din linia osteoblastică (Bianco și Bonucci, 1991), în timp ce Ellen Hauge și colegii săi au arătat în 2001 că situsurile de remodelare ale pacienților cu PHPT au o acoperire foarte extinsă a baldachinului (Hauge et al., 2001). Dimpotrivă, acoperirea cu celule de baldachin este diminuată la femeile cu osteoporoză post-menopauză și la pacienții cu mielom multiplu sau sindrom Cushing (Andersen et al., 2014; Hinge et al., 2015; Jensen et al., 2012). Celulele de baldachin sunt susceptibile de a proveni din celulele învelișului mezenchimal al măduvei osoase (BME). Celulele BME sunt poziționate deasupra suprafețelor quiescente și formează un strat celular extrem de atenuat, care este greu vizibil prin microscopie optică, dar poate fi vizualizat prin microscopie electronică (EM) (Kristensen et al., 2014). Celulele BME și celulele baldachinului compartimentează suprafața osoasă de măduva osoasă adiacentă și este probabil ca acestea să cuprindă o importantă populație progenitoare de osteoblaste (Kristensen et al., 2014). În comparație cu osteoblastele care formează osul, celulele preosteoblastice de baldachin au nuclee alungite și prelungiri celulare lungi care se aseamănă morfologic cu fibroblastele. Acestea se colorează pozitiv pentru markerii osteoblastici, cum ar fi osterix și runx2, dar și pentru markerii care sunt legați de nervi, celule musculare netede, pericite și fibroblaste, cum ar fi CD56 (NCAM), P3NP și SMA (Andersen et al., 2013; Hinge et al., 2015; Jensen et al., 2012; Kristensen et al., 2013, 2014). De remarcat că osterix, runx2 și CD56 marchează, de asemenea, celulele din linia osteoblastică de pe suprafețele erodate, celulele de inversare și osteoblastele care formează osul. Este foarte probabil ca BME și celulele de baldachin să joace un rol necunoscut în reglarea celulelor stem și progenitoare hematopoietice (HSPC). În primul rând, poziția lor coincide cu interacțiunea paracrină putativă dintre celulele de baldachin și celulele măduvei osoase, deoarece baldachinul acoperă osteoclastele și celulele din stirpea osteoblastelor de pe suprafața osoasă. În al doilea rând, unii pacienți cu PHPT dezvoltă anemie, posibil din cauza fibrozei măduvei osoase (Bhadada et al., 2009). În al treilea rând, în urmă cu 30 de ani, un studiu a arătat că ținta osoasă predominantă a hormonului paratiroidian (PTH) nu era osteoblastul matur, ci o celulă preosteoblastică putativă (Rouleau et al., 1988), iar mai recent, receptorul 1 al PTH (PTHR1) a fost evidențiat în celulele de baldachin la copiii cu boală renală severă, iar acoperirea baldachinelor excepțional de multistratificate s-a corelat cu nivelul de PTH (Pereira et al., 2016). În al patrulea rând, atât studiile preclinice, cât și cele clinice au arătat un rol de reglementare al PTH asupra celulelor stem hematopoietice (HSC) și a nișei HSC (Brunner et al., 2007; Yu et al., 2014; Calvi et al., 2003), iar un studiu preclinic a arătat că tratamentul cu PTH după transplantul de măduvă osoasă a dus la o creștere a grefării HSC (Adams et al., 2007). Cu toate acestea, pacienții tratați cu PTH pe o perioadă de 28 de zile după un dublu transplant de sânge din cordonul ombilical nu au obținut o recuperare mai rapidă sau mai bună a numărului de celule sanguine (Ballen et al., 2012). Cu toate acestea, celulele de baldachin fibro-osteoblastic și, posibil, și precursorii lor, celulele BME, sunt principala țintă celulară a PTH, iar incapacitatea de a transfera efectele tratamentului cu PTH de la studiile preclinice la cele clinice nu exclude posibilitatea unui efect, dar subliniază unele dintre dificultățile de transfer al constatărilor de la șoarecii tineri cu modelare osoasă în curs de desfășurare rapidă la oamenii în vârstă cu remodelare osoasă în curs de desfășurare lentă.
Fig. 1. Vizualizarea unei suprafețe de formare a osului. Două imagini obținute pe secțiuni adiacente care au fost fie colorate cu tricromul lui Masson modificat (A), fie dublu colorate pentru CD34 și SMA prin IHC (B). Liniile punctate inferioare indică conturul suprafeței osoase, în timp ce cele superioare indică conturul bolții. Suprafața osteoidă nemineralizată nou formată este albastră, în timp ce osul mineralizat este roșu (A). Observați că numai celulele fibro-osteoblastice alungite din baldachin se colorează pozitiv pentru SMA, în timp ce osteoblastele care formează mai mult osul de plumb se colorează negativ (B). Vârfurile de săgeată galbenă și neagră indică un capilar. Barele de scară = 25 μm. Secțiunile sunt obținute dintr-o biopsie de măduvă osoasă încorporată în parafină de la o femeie voluntară sănătoasă în vârstă de 57 de ani (Comitetul Național Danez pentru Etica Cercetării Biomedicale proiect ID # S-20110112).
.