Nye drostanolonmetabolitter i human urin ved væskekromatografi time-of-flight tandem massespektrometri og deres anvendelse til dopingkontrol

Drostanolon er et af de mest hyppigt påviste anabole androgene steroider i dopingkontrolanalyser. Her undersøgte vi drostanolonmetaboliske urinprofiler ved hjælp af væskekromatografisk firdobbelt time of flight-massespektrometri (LC-QTOF-MS) i fuld scanning og målrettet MS/MS-tilstand med nøjagtig massemåling. Lægemidlet blev administreret til en sund mandlig frivillig, og der blev anvendt flydende-væskeekstraktion sammen med direkte injektion til at analysere urinprøver. Kromatografiske toppe for potentielle metabolitter blev identificeret med den teoretiske – som en mål-ion i et eksperiment med fuld scanning, og faktiske deprotonerede ioner blev analyseret i målrettet MS/MS-tilstand. Elleve metabolitter, herunder fem nye sulfater, fem glucuronidkonjugater og en fri metabolit, blev bekræftet for drostanolon. På grund af fraværet af nyttige fragmentioner til at illustrere steroidringstrukturen af drostanolonfase II-metabolitterne blev gaskromatografimassespektrometri (GC-MS) anvendt til at opnå strukturelle detaljer om den trimethylsilylerede fase I-metabolit, der blev frigivet efter enzymatisk hydrolyse, og der blev foreslået en potentiel struktur ved hjælp af en kombineret MS-tilgang. Metabolitdetektionstider blev registreret, og S4 (2α-methyl-5α-androstan-17-one-6β-ol-3α-sulfat) og G1 (2α-methyl-5α-androstan-17-one-3α-glucuronid) blev anset for at være nye potentielle biomarkører for misbrug af drostanolon, som kan påvises op til 24 dage ved væske-væskeekstraktion og 7 dage ved analyse ved direkte injektion efter intramuskulær injektion. S4 og G1 blev også påvist i to drostanolon-positive rutineurinprøver.