11-デオキシコルチゾール（化合物S）は、コルチゾールの直接の前駆体である。
11β水酸化酵素
11デオキシコルチゾール—————————->コルチゾール
化合物Sは通常、副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）レベルが上昇した場合（例：クッシング病、ACTH産生腫瘍）、あるいは11β水酸化酵素欠損（先天的副腎過剰症（CAH）のまれなサブフォーム）で増加します。 11β水酸化酵素欠損によるCAHでは、コルチゾールレベルが低いため、下垂体ACTH産生が増加し、血清および尿中の11-デオキシコルチゾールレベルが上昇する。
メチラポンによる11β水酸化酵素の薬学的遮断は、視床下部-下垂体-副腎軸（HPA）の機能評価に使用することができる。 この方法では、患者にメチラポンを投与し、血清11-デオキシコルチゾール値または尿中17-ヒドロキシステロイド値を、ベースライン（深夜）と8時間後（オーバーナイトテスト）、または2日間のメチラポン試験（2日間にわたって1日4回のメチラポン投与）においてベースラインと1日1回のいずれかで測定する。 2日間のメチラポン検査は、複数の時間を決めて尿や血液を採取するという物流上の問題や、オーバーナイト検査で非常によく似た結果が得られることから、ほとんど実施されていない。 いずれの場合も、メチラポン投与に対する正常な反応は血清コルチゾールレベルの低下であり、下垂体ACTH分泌の上昇を引き起こし、その結果、11-デオキシコルチゾールからコルチゾールへの変換ブロックが継続するため11-デオキシコルチゾールレベルの上昇につながる。
副腎不全を疑う診断ワークアップにおいて、一晩メチラポン検査の結果はHPA軸評価のゴールドスタンダードであるインシュリン低血糖検査に近い相関を持っている。 メチラポン検査中に11-デオキシコルチゾールの測定とACTHの測定を組み合わせることにより、検査の成績はさらに向上する。 HPA軸のいずれかの構成要素に障害があると、11-デオキシコルチゾールレベルの上昇は正常でなくなる。 一方、原発性副腎不全（アジソン病）の診断の基幹となる標準量または低用量ACTH(1-24)（コシントロピン）刺激試験は、副腎細胞のACTH刺激に対する応答能力のみを評価するものである。 これにより、原発性副腎不全の診断が明確になる一方で、二次性・三次性副腎不全の場合、メチラポン検査は標準量ACTH（1-24）刺激検査や低用量ACTH（1-24）刺激検査よりも感度と特異性が高い。 クッシング病（下垂体依存性ACTH過剰産生）では、ACTH過剰分泌下垂体組織が通常のフィードバック刺激に反応したままであるが、正常状態よりも高い「セットポイント」で、メチラポン投与後にACTH分泌と11-デオキシコルチゾール産生が増加する結果となった。 対照的に、原発性副腎皮質ホルモン過剰分泌または異所性ACTH分泌によるクッシング症候群では、下垂体ACTH産生は適切に停止し、通常メチラポン投与後にACTH、ひいては11-デオキシコルチゾールのそれ以上の上昇はない。 メチラポン試験は、クッシング病の鑑別診断において、高用量デキサメタゾン抑制試験と同等の感度と特異度を有するが、簡便な自動11-デオキシコルチゾール測定法がないため、あまり広く使用されていない。 近年、両検査は、前頭洞血清ACTHサンプリングによるコルチコトロピン放出ホルモン（CRH）刺激検査にある程度取って代わられている＜7967＞。