Hyperkromitet

Hyperkromitet är ökningen av absorbansen (optisk densitet) hos ett material. Det mest kända exemplet är en hyperkromicitet hos ett DNA som uppstår när DNA-duplex denatureras. UV-absorptionen ökar när de två enskilda DNA-strängarna separeras, antingen genom värme eller genom tillsats av denatureringsmedel eller genom sänkning av pH-värdet. Motsatsen, en minskning av absorbansen kallas hypokromicitet.

Tillkommande rekommenderad kunskap

Värme denaturering av DNA, även kallad smältning, leder till att dubbelhelixstrukturen avvecklas för att bilda enkelsträngat DNA. När DNA i lösning värms upp över smältningstemperaturen (vanligen mer än 80 oC) avvecklas det dubbelsträngade DNA:t för att bilda enkelsträngat DNA. Baserna lossnar från varandra och kan därmed absorbera mer ljus. I sitt ursprungliga tillstånd absorberar baserna i DNA ljus i våglängdsområdet 260 nm. När baserna lossnar från varandra ändras inte våglängden för maximal absorbans, men den absorberade mängden ökar med 30-40 %.

Hyperkromicitet kan användas för att spåra DNA:s tillstånd när temperaturen förändras. Övergångs-/smältningstemperaturen (Tm) är den temperatur där absorbansen av UV-ljus är 50 % mellan maximalt och minimalt, dvs. där 50 % av DNA:t är denaturerat.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.